https://hdl.handle.net/11185/13 Sat, 31 Oct 2026 11:48:50 GMT 2026-10-31T11:48:50Z https://hdl.handle.net/11185/9053 Uso terapéutico de la formulación vacunal transialidasa-ispa durante la fase crónica de la infección por Trypanosoma cruzi Cacik, Paula Inés La enfermedad de Chagas (Trypanosoma cruzi) es una causa primordial de miocardiopatía infecciosa. En su fase crónica, la limitada eficacia del benznidazol, la persistencia del parásito y una respuesta inmune desequilibrada conducen al desarrollo de la miocardiopatía chagásica crónica. Frente a esto, esta tesis evaluó estrategias quimioinmunoterapéuticas orientadas al control parasitario y la modulación inmunológica a lo largo de tres etapas consecutivas. En la primera etapa, el binomio BALB/c–Tulahuen cl2 fue el único adecuado para modelar la cronicidad, destacándose la vía intradérmica por su alta supervivencia e infectividad, y la vía oral por inducir daño cardíaco y alteraciones de conducción evaluables. En la segunda etapa, la inmunoterapia con proteína Transialidasa (TS) por vías nasal o subcutánea redujo significativamente la carga parasitaria miocárdica, atenuó el infiltrado inflamatorio y mejoró parámetros electrocardiográficos y biomarcadores séricos de daño y estrés oxidativo. Finalmente, en la tercera etapa, tras comprobar que ciclos cortos de benznidazol rescatan la competencia inmune celular, se evaluó un esquema secuencial que intercaló dosis breves del fármaco con la vacuna (Bz-TS-Bz3). Este protocolo resultó ser la estrategia más eficaz de todas: redujo la carga parasitaria hasta niveles indetectables en algunos animales, normalizó el intervalo QTc, preservó la arquitectura tisular, atenuó anticuerpos patogénicos e indujo una respuesta celular balanceada con linfocitos T efectores regulados por altos niveles de IL-10.; Chagas disease (Trypanosoma cruzi) is a leading cause of infectious cardiomyopathy. In its chronic phase, the limited efficacy of benznidazole, parasite persistence, and an unbalanced immune response lead to the development of chronic Chagasic cardiomyopathy. In this context, this thesis evaluated chemoimmunotherapeutic strategies aimed at parasite control and immune modulation across three consecutive stages. In the first stage, the BALB/c–Tulahuen cl2 pairing was the only one suitable for modeling chronicity, with the intradermal route standing out for its high survival and infectivity, and the oral route for inducing cardiac damage and measurable conduction abnormalities. In the second stage, immunotherapy with trans-sialidase (TS) protein by the nasal or subcutaneous route significantly reduced myocardial parasite load, attenuated the inflammatory infiltrate, and improved electrocardiographic parameters and serum biomarkers of damage and oxidative stress. Finally, in the third stage, after confirming that short benznidazole cycles rescue cellular immune competence, a sequential scheme interspersing brief doses of the drug with the vaccine (Bz-TS-Bz3) was evaluated. This protocol proved to be the most effective strategy of all: it reduced parasite load to undetectable levels in some animals, normalized the QTc interval, preserved tissue architecture, attenuated pathogenic antibodies, and induced a balanced cellular response, with effector T lymphocytes regulated by high IL-10 levels. Fil: Cacik, Paula Inés. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Wed, 24 Jun 2026 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/9053 2026-06-24T00:00:00Z https://hdl.handle.net/11185/9008 Utilización del 5-fluorouracilo para optimizar un candidato vacunal con elevada capacidad protectiva contra Trypanosoma cruzi en diferentes modelos murinos Borgna, Eliana La enfermedad de Chagas, causada por Trypanosoma cruzi, sigue siendo un problema de salud pública global, cuyo control se ve limitado por la ausencia de una vacuna efectiva debido a la complejidad del parásito y su capacidad de modular la respuesta inmune. Esta tesis abordó la vacunación desde una perspectiva integral, considerando tanto los mecanismos efectores como regulatorios. Se evaluó un candidato vacunal basado en una fracción de trans-sialidasa (TSf) formulada con ISPA, combinado con la depleción transitoria de células supresoras de origen mieloide (MDSCs) mediante 5-fluorouracilo (5FU). Se optimizó un esquema de doble administración de 5FU que permitió controlar la expansión de células CD11b⁺Gr-1⁺ durante la inmunización. Este protocolo mejoró la respuesta celular y aumentó la protección frente a infecciones letales en modelos murinos. Además, mostró eficacia en distintos modelos experimentales y capacidad de inducir memoria inmunológica. A nivel de mecanismos, se observó un aumento de linfocitos T CD4⁺ y CD8⁺, incluyendo poblaciones de memoria, y de células dendríticas funcionales. También se desarrolló una estrategia de monitoreo en sangre periférica para evaluar correlatos de protección. En conjunto, los resultados demuestran que la modulación de MDSCs potencia la eficacia vacunal, resaltando la importancia de integrar componentes regulatorios en el diseño de vacunas contra patógenos complejos.; Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi, remains a global public health problem, whose control is hindered by the lack of an effective vaccine due to the parasite’s biological complexity and its ability to modulate the host immune response. This thesis addressed vaccination from an integrated perspective, considering both effector and regulatory immune mechanisms. A vaccine candidate based on a trans-sialidase fragment (TSf) formulated with ISPA was evaluated, combined with the transient depletion of myeloid-derived suppressor cells (MDSCs) using 5-fluorouracil (5FU). A double 5FU administration scheme was optimized, allowing control of CD11b⁺Gr-1⁺ cell expansion during immunization. This protocol improved cellular immune responses and enhanced protection against lethal infections in murine models without affecting the humoral response. Moreover, it proved effective across different experimental settings and was capable of inducing immunological memory. At the mechanistic level, an increase in CD4⁺ and CD8⁺ T lymphocytes, including memory populations, as well as functional dendritic cells, was observed. In addition, a peripheral blood monitoring strategy was developed to assess correlates of protection. Overall, these results demonstrate that modulation of MDSCs enhances vaccine efficacy, highlighting the importance of integrating regulatory components into the design of vaccines against complex pathogens. Fil: Borgna, Eliana. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Tue, 25 Aug 2026 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/9008 2026-08-25T00:00:00Z https://hdl.handle.net/11185/8976 Impacto de la exposición a xenoestrógenos sobre las poblaciones de células germinales Galliani, Valentina La exposición a disruptores endocrinos (DE), como el filtro UV Benzofenona-3 (BP3) y el Bisfenol A (BPA), es ubicua debido a su presencia en productos de uso cotidiano y representa una amenaza para la salud reproductiva femenina. La tesis evaluó el impacto de dosis relevantes de BP3, BPA y su mezcla durante períodos críticos del desarrollo sobre la capacidad reproductiva a largo plazo. Se integraron modelos in vivo de exposición prenatal y perinatal, considerando la multiparidad como factor de susceptibilidad diferencial, análisis proteómico y modelos de ovulación in vitro mediante el cultivo de folículos aislados. La exposición dérmica perinatal a BP3 no alteró los parámetros gestacionales maternos, pero produjo subfertilidad temprana en las hijas, evidenciada por un menor número de gestaciones. Esto se asoció con una reducción de la reserva ovárica, caracterizada por una menor cantidad de ovocitos totales y folículos primordiales. La exposición prenatal a BP3, BPA o su mezcla inhibió la ovulación en respuesta a gonadotrofinas específicamente en la descendencia de la segunda gestación, sin afectar a la primera camada. El análisis proteómico reveló un colapso metabólico ovárico, con fallas en la β-oxidación mitocondrial y la proteostasis. Los sistemas de cultivo de folículos aislados mostraron que BP3 y BPA inhiben directamente la ovulación a concentraciones relevantes para la exposición humana. Este efecto se vinculó con un menor crecimiento folicular en respuesta a FSH, probablemente por interferencia con el receptor de estrógenos beta. En conclusión, ambos compuestos comprometen la fertilidad femenina mediante mecanismos exacerbados por la historia reproductiva materna.; Exposure to endocrine disruptors (EDs), such as the UV filter benzophenone-3 (BP3) and bisphenol A (BPA), is ubiquitous because of their presence in everyday consumer products and represents a threat to female reproductive health. This thesis evaluated the impact of relevant doses of BP3, BPA, and their mixture during critical developmental periods on long-term reproductive capacity. In vivo models of prenatal and perinatal exposure were integrated with proteomic analyses and in vitro ovulation models using isolated follicle culture, while considering multiparity as a factor of differential susceptibility. Perinatal dermal exposure to BP3 did not alter maternal gestational parameters but caused early subfertility in female offspring, as evidenced by fewer pregnancies. This was associated with a reduction in the ovarian reserve, characterized by lower numbers of total oocytes and primordial follicles. Prenatal exposure to BP3, BPA, or their mixture inhibited ovulation in response to gonadotropins specifically in offspring from the second pregnancy, without affecting the first litter. Proteomic analysis revealed ovarian metabolic collapse, with impairments in mitochondrial β-oxidation and proteostasis. Isolated follicle culture systems showed that BP3 and BPA directly inhibit ovulation at concentrations relevant to human exposure. This effect was associated with reduced follicular growth in response to FSH, probably through interference with estrogen receptor beta. In conclusion, both compounds compromise female fertility through mechanisms exacerbated by maternal reproductive history. Fil: Galliani, Valentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Thu, 02 Jul 2026 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/8976 2026-07-02T00:00:00Z https://hdl.handle.net/11185/8946 Estudio de la dilatación del cérvix uterino en el parto. Regulación endócrina de las modificaciones del colágeno y la infiltración de leucocitos en el cérvix uterino de rata y oveja Ramos, Jorge Guillermo El cérvix uterino actúa durante la gestación como una barrera anatómica y fisiológica entre el medio externo y el intrauterino, función que se revierte durante el parto mediante un proceso de remodelación que permite su dilatación. Este proceso involucra modificaciones en la matriz extracelular, especialmente en el colágeno y los proteoglicanos, así como infiltración leucocitaria y aumento del contenido de agua del órgano. Los objetivos de esta tesis fueron establecer la asociación entre la infiltración de eosinófilos y la degradación del colágeno durante el parto en la rata; determinar la participación del estradiol (E2), la progesterona (Pg) y la relaxina (Rlx) en la regulación de la infiltración leucocitaria y la remodelación del colágeno; e investigar si estos fenómenos también ocurren en el cérvix de la oveja. Se utilizaron ratas Wistar y ovejas Corriedale, aplicando distintos modelos experimentales para evaluar el efecto hormonal sobre la infiltración celular y la colagenólisis. Los resultados demostraron que, en la rata, la infiltración de eosinófilos y la colagenólisis son fenómenos sincrónicos, pero regulados por mecanismos hormonales diferentes: el E2 promueve la infiltración de eosinófilos, la Pg la inhibe y la Rlx promueve principalmente la degradación del colágeno. En la oveja, el parto se asoció con intensa infiltración de neutrófilos y extensa colagenólisis, ausentes en los animales no preñados. Se concluye que la infiltración leucocitaria y la remodelación del colágeno constituyen procesos independientes, regulados diferencialmente por hormonas específicas durante el parto.; The uterine cervix acts during pregnancy as an anatomical and physiological barrier between the external environment and the intrauterine environment. During parturition, this function is reversed through a remodeling process that allows cervical dilation. This process involves modifications of the extracellular matrix, particularly collagen and proteoglycans, as well as leukocyte infiltration and an increase in the water content of the cervical tissue. The objectives of this thesis were to determine the association between eosinophil infiltration and collagen degradation during parturition in the rat; to establish the role of estradiol (E2), progesterone (Pg), and relaxin (Rlx) in the regulation of leukocyte infiltration and collagen remodeling; and to investigate whether these phenomena also occur in the ovine cervix. Wistar rats and Corriedale sheep were used, applying different experimental models to evaluate the hormonal effects on cellular infiltration and collagen degradation. The results demonstrated that, in the rat, eosinophil infiltration and collagen degradation are synchronous events but are regulated by different hormonal mechanisms: E2 promotes eosinophil infiltration, Pg inhibits it, and Rlx primarily promotes collagen degradation. In sheep, parturition was associated with intense neutrophil infiltration and extensive collagen degradation, both of which were absent in non-pregnant animals. In conclusion, leukocyte infiltration and collagen remodeling are independent processes that are differentially regulated by specific hormones during parturition. Fil: Ramos, Jorge Guillermo. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Fri, 23 Mar 2001 00:00:00 GMT https://hdl.handle.net/11185/8946 2001-03-23T00:00:00Z