Identificación del virus de la diarrea viral bovina mediante inmunohistoquímica en abortos bovinos de la "Cuenca Lechera Santafesina" y comparación con los resultados obtenidos con el aislamiento viral y la inmunofluorescencia directa

Abstract

El objetivo de la presente investigación fue identificar mediante inmunohistoquímica antígenos del vDVB en órganos de 50 fetos abortados fijados en formol y comparar los resultados con los obtenidos con el Aislamiento viral y la Inmunofluorescencia directa. El material fue remitido al Hospital de Salud Animal desde distintas localidades de la Cuenca lechera Santafesina, donde se tomaron muestras de distintos órganos. Se compararon las lesiones observadas en los tejidos analizados en fetos con y sin aislamiento del virus y se realizaron distintas técnicas de recuperación antigénica previo a la técnica de IHQ. Se utilizaron anticuerpos monoclonales diferentes para identificar cada genotipo del vDVB (157 para el genotipo I y BA-29 para el genotipo II). Por último, se compararon los resultados obtenidos entre las distintas técnicas diagnósticas utilizadas, tomando al aislamiento viral como técnica de referencia. Encontramos relación estadísticamente significativa entre el aislamiento viral y las lesiones de necrosis linfoidea en ganglios linfáticos, necrosis del epitelio de la mucosa de la válvula ileocecal y necrosis linfoidea en placas de Peyer. La recuperación antigénica que brindó mejores resultados fue la realizada con proteinasa K. Fueron detectados antígenos del genotipo I del virus, no se revelaron antígenos del genotipo II. Los valores de Chi-cuadrado y p indican relación estadística significativa entre los resultados del aislamiento viral con la IFD y la IHQ, y el índice kappa muestra una concordancia moderada entre aislamiento e IFD, y leve entre aislamiento e IHQ.

The purpose of the present thesis was to identify through immunohistochemistry antigens of bovine viral diarrea virus in formalin fixed tissues of bovine aborted fetuses, and to compare the results with virus isolation and direct immunofluorescence. Samples were submitted to Animal Health Hospital from different farms located in the so called “Cuenca Lechera Santafesina”, being taken from different organs. The observed lesions in analized tissues were compared to fetuses with and without virus isolation, and different methods of antigenic retrieval were achieved before immunohistochemistry. Different monoclonal antibodies were used to identify each BVDv genotypes (157 for genotype I and BA-29 for genotype II). Finally, the results obtained from different methods were compared, using virus isolation as the gold standard technique. We found a significant ratio between virus isolation and the lesions of lymphatic necrosis from lymph nodes, necrosis of mucosal epithelium and lymphatic tissues of Peyer’s patches. Proteinase K treatment showed the best results in antigenic retrieval. BVDv genotype I antigens were detected, nevertheless any antigens of genotype II was found. The Chi-square value and the p value indicated a significant ratio between the results of viral isolation and direct inmunofluorescence and immunohistochemistry. The kappa value showed a good concordance into viral isolation and IFD, and a moderate concordance into viral isolation and immunohistochemistry.