Detección fotométrica de residuos de antimicrobianos en leche mediante el sistema microbiológico ResScreen

Abstract

Para evitar los efectos perjudiciales que producen los residuos de antibióticos sobre la salud del consumidor y la industria láctea, se utilizan métodos de inhibición microbiológica. El sistema microbiológico ResScreen® permite detectar e identificar en forma específica antibióticos betalactámicos, tetraciclinas y sulfonamidas en un tiempo de 4 horas, mediante la utilización simultánea de los bioensayos BT (púrpura) y BS (negro). El objetivo del presente trabajo fue implementar un lector fotométrico para el análisis de los resultados del método ResScreen® y evitar las apreciaciones subjetivas de las interpretaciones visuales. Se establecieron los puntos de corte (cut off) para ambos bioensayos mediante el uso de las curvas ROC. Los valores de cut off fueron de 0.84, y 0.86 unidades de densidades ópticas para los bioensayos BT (especificidad 0.944, sensibilidad 0.942) y BS (especificidad 0.971, sensibilidad 0.968), respectivamente. El cirterio para calcular los límites de detección resultaron similares al 45% establecidos por comúnmente para otros métodos de screening (49% para bioensayo BT y 48% para bioensayo BS). El bioensayo BT permite detectar residuos de amoxicilina, ampicilina, cloxacilina, oxacilina, penicilina “G”, cefalexina, cefoperazone, ceftiofur®, clortetraciclina, oxitetraciclina, tetraciclina, neomicina, lincomicina y tilosina a niveles cercanos a los LMRs, en tanto que bioensayo BS detecta amoxicilina, ampicilina, cloxacilina, oxacilina, penicilina “G”, cefalexina, cefoperazone, ceftiofur®, sulfadiazina, sulfadimetoxina, sulfametazina, sulfametoxazol, sulfatiazol, neomicina, lincomicina y tilosina a niveles similares a sus LMRs.

The microbial inhibition methods are used to avoid the detrimental effects that antibiotic residues produce on consumer health and the dairy industry. The microbiological system ResScreen ® can detect and identify beta-lactam antibiotics, tetracyclines and sulfonamides in 4 hours, using simultaneously the bioassays BT (purple) and BS (black). The aim of this study was to implement a photometric reader to analysis the results of the method ResScreen ® and avoid the subjective perception of visual interpretations. It were established cut offs points for both bioassays using ROC curves. The cut off values were 0.84, and 0.86 OD units for bioassays BT (specificity 0.944, sensitivity 0.942) and BS (0971 specificity, sensitivity 0.968), respectively. The criteria for calculating the limits of detection were close to the 45% established for other screening methods (49% for BT bioassay and 48% for bioassay BS). The bioassay BT can detect residues of amoxicillin, ampicillin, cloxacillin, oxacillin, penicillin "G", cephalexin, cefoperazone, ceftiofur ®, chlortetracycline, oxytetracycline, tetracycline, neomycin, lincomycin and tylosin at levels close to the MRLs. The bioassay BS can detect amoxicillin, ampicillin, cloxacillin, oxacillin, penicillin "G", cephalexin, cefoperazone, ceftiofur ®, sulfadiazine, sulfadimethoxine, sulfamethazine, sulfamethoxazole, sulfathiazole, neomycin, lincomycin and tylosin at levels similar to their MRLs.