Estudio de factores asociados a la patogénesis de la infección por Helicobacter pylori

Abstract

H. pylori causa gastritis crónica y es factor etiológico de carcinoma gástrico. La transición hacia cáncer gástrico involucraría factores de virulencia bacterianos y factores inherentes al huésped. Nuestros objetivos fueron: a) detectar genes de virulencia cagA, vacA y babA2 de H. pylori (PCR de punto final); b) evaluar polimorfismos de simple nucleótido (SNP) -174 G>C (IL-6) y -251 T>A (IL-8) en pacientes infectados (RFLP-PCR); c) correlacionar genotipos de H. pylori, polimorfismos en citoquinas y hallazgos histopatológicos en pacientes ; d) detectar mutaciones A2142G y A2143G del gen ARNr 23S de H. pylori (PCR-RFLP y ASP-PCR) y e) diseñar un nuevo ensayo de PCR en tiempo real para identificar H. pylori. 132 pacientes H. pylori (+) fueron diagnosticados con a) gastritis crónica inactiva (GCI), b) gastritis crónica activa sin metaplasia intestinal [GCAMI (-)] y c) gastritis crónica activa con metaplasia intestinal [GCAMI (+)]. GCAMI (+) tuvo la mayor proporción de las combinaciones entre genotipos más virulentos y el SNP de mayor expresión en el promotor de IL6. GCAMI (-) mostró la mayor proporción de las combinaciones entre genotipos más virulentos y SNP de moderada/ alta expresión en el promotor de IL8. 20,9% de muestras H. pylori (+) presentaron mutaciones de resistencia a claritromicina. Finalmente, se pudo diseñar un ensayo de PCR en tiempo real para detectar el gen hsp60 de H. pylori. Estos datos constituyen el primer análisis en nuestra región (Santa Fe, Argentina) de factores involucrados en alteraciones en la mucosa gástrica asociados a la infección por H. pylori.

H. pylori causes chronic gastritis and it is an etiologic factor for gastric carcinoma. The transition towards gastric cancer would involve bacterial virulence factors as well as factors inherent to the host. Our objectives were: a) to detect H. pylori virulence genes cagA, vacA and babA2 (by endpoint PCR); b) to evaluate single nucleotide polymorphisms (SNP)-174 G>C (IL-6) and -251 T>A (IL-8) in infected patients (using RFLP-PCR); c) to correlate H. pylori genotypes, cytokine polymorphisms and histopathological findings in patients; d) to detect A2142G and A2143G mutations in the H. pylori 23S rRNA gene (by PCR-RFLP and ASP-PCR) and e) design a new real-time PCR assay to identify H. pylori. 132 H. pylori (+) patients were diagnosed with a) chronic inactive gastritis (ICG), b) chronic active gastritis without intestinal metaplasia [GCAMI (-)], and c) chronic active gastritis with intestinal metaplasia [GCAMI (+)]. GCAMI (+) presented the highest proportion of combinations between most virulent genotypes and the high expression SNP in IL6 gene. GCAMI(-) showed the highest proportion of combinations between more virulent genotypes and moderate and high expression SNP in the IL8. 20.9% of H. pylori (+) samples presented resistance mutations to clarithromycin. Finally, a real-time PCR assay could be designed to detect the H. pylori hsp60 gene. These data constitute the first analysis in our region (Santa Fe, Argentina) of factors involved in the development of alterations in the gastric mucosa associated with H. pylori infection.